【佳学基因检测】分子诊断与基因检测中各种不同的PCR技术
1.递减PCR(touchdown PCR):前几循环温度逐渐下降。
2.逆转录PCR(RT-PCR):以由mRNA逆转录而来的cDNA 为模板,也因为是从表现型基因来进行增量的,由此产生出来的cDNA 产物不带有内含子(基因中不具意义的段落),常应用于分子克隆技术。
3.热启动PCR(hotstart PCR):以高热激活型核酸聚合酶进行反应,减少非专一性产物。
4.巢式PCR(nested PCR):先用低特异性引物扩增几个循环以增加模板数量,再用高特异性引物扩增。
5.多重PCR(multiplex PCR):在同一个管中使用多组引物。
6.复原条件PCR(reconditioning PCR):PCR 产物稀释 10 倍后重新放入原浓度的引物和dNTP 等循环 3 次,以消除产物中的异二聚体。
7.dsRNA 合成(dsRNA replicator):合并使用high-fidelity DNA polymersae、T7RNA聚合酶与Phi6 RNA replicase;从双股 DNA转录为对应的双股RNA(dsRNA)。可应用于RNAi实验操作。
8.COLD-PCR (co-amplification at lower denaturation temperature PCR):用以检测突变或特殊等位基因的PCR 应用技术。
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